allumiqs磁珠憑借高特異性結(jié)合、分離快速、純度高的優(yōu)勢(shì)，廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室核酸(DNA/RNA)提取，適配血清、組織、細(xì)胞、痰液等多種樣品類型，操作流程簡(jiǎn)潔，可實(shí)現(xiàn)高效純化，以下為標(biāo)準(zhǔn)操作步驟及關(guān)鍵要點(diǎn)。
 

　　一、實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備
 

　　1. 試劑準(zhǔn)備
 

　　核心試劑：allumiqs磁珠懸液(使用前充分顛倒混勻，確保磁珠均勻分散)、裂解液、結(jié)合液、洗滌液Ⅰ、洗滌液Ⅱ、洗脫液(無酶水或TE緩沖液)。
 

　　試劑預(yù)處理：洗滌液需提前確認(rèn)是否添加無水乙醇(按試劑說明書要求)，所有試劑恢復(fù)至室溫(20-25℃)，避免溫度影響結(jié)合效率。
 

　　2. 儀器與耗材準(zhǔn)備
 

　　儀器：磁力架、移液器(10μL、100μL、1000μL)、離心機(jī)、恒溫水浴鍋(可選，用于樣品裂解)。
 

　　耗材：無酶離心管(1.5mL)、無酶吸頭，所有耗材提前滅菌處理，避免核酸污染。
 

　　3. 樣品準(zhǔn)備
 

　　根據(jù)樣品類型處理至均一狀態(tài)(如組織研磨、細(xì)胞裂解)，確保樣品充分破碎，釋放核酸；避免樣品中含有大量雜質(zhì)、蛋白或強(qiáng)抑制劑(如酚、氯仿)。
 

　　二、標(biāo)準(zhǔn)操作步驟
 

　　1. 樣品裂解(關(guān)鍵步驟)
 

　　取處理好的樣品(200μL，可按比例調(diào)整)加入1.5mL無酶離心管中。
 

　　加入200μL裂解液，顛倒混勻10-15次，室溫放置5-10min(若為難裂解樣品，可置于56℃水浴10min，期間顛倒混勻2-3次)，確保樣品完全裂解。
 

　　2. 磁珠結(jié)合核酸
 

　　向裂解后的樣品中加入20μL allumiqs磁珠懸液(提前混勻)，再加入200μL結(jié)合液，充分顛倒混勻30s，室溫靜置5min，使核酸與磁珠充分結(jié)合。
 

　　將離心管置于磁力架上，靜置1-2min，待磁珠完全吸附至管壁(溶液澄清)，緩慢吸棄上清液(注意不要觸碰磁珠)。
 

　　3. 洗滌除雜(兩次洗滌，去除雜質(zhì))
 

　　保持離心管在磁力架上，加入500μL洗滌液Ⅰ，取下離心管，顛倒混勻10次，重新置于磁力架上，靜置1min，吸棄上清液。
 

　　重復(fù)上述操作，加入500μL洗滌液Ⅱ，顛倒混勻10次，磁力架吸附1min，吸棄上清液；用移液器輕輕吸盡管底殘留液體(避免損傷磁珠)。
 

　　4. 干燥磁珠(避免殘留影響洗脫)
 

　　保持離心管在磁力架上，開蓋室溫放置3-5min，直至磁珠完全干燥(無光澤、不粘壁)，切勿過度干燥(否則會(huì)導(dǎo)致核酸洗脫效率下降)。
 

　　5. 核酸洗脫(核心步驟)
 

　　取下離心管，加入30-50μL洗脫液(無酶水或TE緩沖液)，顛倒混勻10-15次，確保磁珠完全懸浮于洗脫液中。
 

　　將離心管置于56℃水浴中孵育5min(可選，提升洗脫效率)，期間顛倒混勻1次。
 

　　將離心管放回磁力架，靜置1-2min，待磁珠完全吸附，緩慢吸取上清液(含純化核酸)至新的無酶離心管中，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)(PCR、測(cè)序等)。
 

　　三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
 

　　allumiqs磁珠使用前必須充分顛倒混勻，避免磁珠沉淀，影響結(jié)合效率；每次加樣后需徹底混勻，確保反應(yīng)充分。
 

　　全程使用無酶耗材，操作過程中佩戴手套、口罩，避免人體毛發(fā)、皮膚分泌物污染核酸。
 

　　洗滌步驟中，上清液需吸棄干凈，殘留洗滌液會(huì)抑制后續(xù)實(shí)驗(yàn)；干燥磁珠時(shí)，不可過度干燥，否則會(huì)導(dǎo)致核酸難以洗脫。
 

　　洗脫液體積可根據(jù)需求調(diào)整(30-100μL)，體積越小，核酸濃度越高；洗脫液建議現(xiàn)用現(xiàn)配，避免污染。
 

　　提取后的核酸需置于-20℃保存，避免反復(fù)凍融；allumiqs磁珠需按說明書要求儲(chǔ)存(通常4℃密封保存)，避免陽光直射。
 

　　若提取核酸純度偏低，可增加一次洗滌步驟；若產(chǎn)量偏低，可延長(zhǎng)磁珠結(jié)合時(shí)間或增加磁珠用量。
 

　　四、常見問題提示
 

　　1. 磁珠吸附不充分：檢查磁力架是否正常，或磁珠是否失效；確保結(jié)合步驟混勻充分、靜置時(shí)間足夠。
 

　　2. 洗脫后無核酸：可能是樣品裂解不充分，或磁珠過度干燥，可重新處理樣品或調(diào)整干燥時(shí)間。
 

　　3. 核酸純度低：樣品雜質(zhì)過多，可增加裂解時(shí)間或提前去除樣品中的蛋白、雜質(zhì)。