土壤多酚氧化酶（SPPO）檢測試劑盒

測定意義：

S-PPO 主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放，催化土壤中芳香族化合物氧化成

醌，醌與土壤中蛋白質、氨基酸、糖類、礦物等物質反應生成有機質和色素，完成土壤芳香族化合物循環(huán)，

用于土壤環(huán)境修復。

測定原理：

S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產生有色物質，后者在 430nm 有特征光吸收。

自備用品：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、yi醚 50mL（不

允許快遞）和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：粉劑×2 瓶，4℃保存；臨用前取一瓶，加入 7mL 蒸餾水充分溶解后待用；用不完的試劑 4℃保存

一周。

試劑二：液體 6mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：yi醚 50mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。

測定步驟：

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 430nm，蒸餾水調零。

2、 加樣表

振蕩數(shù)次，室溫靜置 30min，取 200μL 上層液于 430nm 處測定吸光值 A。

（注意：1、因yi醚粘度小，易掉液，吸取前需先將槍頭在上層液里潤洗 2~3 次，再轉移測定；2、yi醚易

揮發(fā)，轉移到 96 孔板后立即測定，最好一個一個測定）。

S-PPO 活力計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為 y = 8.97x -0.003；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值 A。

單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。

S-PPO 活力（mg /d/g 土樣）＝(A+0.003) ÷8.97×V 反總÷W÷T=80×(A+0.003)

T：反應時間，1h=1/24d； V 反總：反應體系總體積 0.6mL；W：樣本質量，0.02g。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為 y = 4.485x -0.003；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值 A。

單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。

S-PPO 活力（mg/d/g 土樣）＝(A+0.003) ÷4.485×V 反總÷W÷T=160×(A+0.003)

T：反應時間，1h=1/24d； V 反總：反應體系總體積 0.6mL；W：樣本質量，0.02g。

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